В пособии Г. А Меркулова "Курс патологогистологической техники" описан интересный спосо...
В пособии Г. А Меркулова "Курс патологогистологической техники" описан интересный способ окраски гистологических срезов соком черники. На правах исторического экскурса держу в курсе. Приготовить краситель из сока черники можно двумя способами: по М.Д. Лавдовскому и по В.С. Желтикову. Последний способ удобнее и результативнее, а препараты, им окрашенные, отличаются большой стойкостью и сохраняются годами. ⚗️ 1. Приготовление красящего раствора по Лавдовскому : Сок из свежевыжатых ягод разводят двумя объемами воды с небольшим количеством спирта и кипятят. Горячую жидкость фильтруют и сохраняют в холодном месте в закупоренных склянках. При употреблении нужное количество краски разводят водой в несколько раз. ⚗️ 2. Приготовление красящего раствора по Желтикову: Представляет собой настаивание черники на чистом 96° этиловом спирте: свежие ягоды черники хорошо промывают в водопроводной воде, затем тщательно разминают при помощи фарфорового пестика (или столовой ложки). Полученную полужидкую массу смешивают в равных объемных отношениях с 96° спиртом и оставляют настаиваться в течение 1—2 дней. По истечении указанного срока настой фильтруют через тонкий слой ваты (или бумажный фильтр). Получается темно-вишневый и совершенно прозрачный раствор. В таком виде в темной склянке (или в темном месте) раствор сохраняется в течение какого угодно времени при обычной комнатной температуре. Для окраски вышеуказанный спиртовой раствор черники смешивают пополам с 2% водным раствором калийных квасцов (на дистиллированной воде). Такая красящая квасцовая смесь отличается стойкостью и может быть сразу приготовлена в значительном количестве на 1—2 месяца. Во избежание возможного развития плесени в приготовленную смесь добавляют несколько кристалликов тимола. Меркулов отмечает, что приготовленная таким способом краска отличается прекрасными красящими свойствами. Перед употреблением её фильтруют и то лишь с того момента, когда после повторного использования она загрязнится и в срезах начнут появляться осадки. Худшие и непостоянные результаты дают растворы, приготовленные из сухой черники. Красящий раствор из сухой черники можно приготовить так: 25 г сухой черники заливают 100 мл дистиллированной воды и 20 мл 96° спирта, кипятят в колбе несколько минут и охлаждают, через сутки фильтруют, а для предупреждения плесени добавляют несколько кристалликов тимола. Краска сравнительно скоро портится, поэтому ее готовят небольшими порциями на 2—3 недели. Указывается, что сотрудниками Института им. Склифосовского удалось получить краситель из сухой черники - миртиллин. 📋 Протокол окраски с красителем Лавдовского: Берут нужное количество краски, разводят в несколько раз водой и фильтруют через тонкий рыхлый фильтр. Длительность окрашивания — около 5 минут. Срезы, замороженные предварительно, хорошо обезжиривают. Окрашенные в розовый цвет срезы быстро прополаскивают в простой воде и переносят в 1% водный раствор уксуснокислого свинца на несколько секунд, до потемнения. После этого срезы промывают в воде, слабо подкрашивают эозином, проводят через спирты и заключают по общим правилам в бальзам. Сок черники дает розовое окрашивание, которое долго не сохраняется. Под влиянием уксуснокислого свинца срезы быстро темнеют и окраска приобретает стойкий характер. Ядра эпителия и лимфоидные элементы окрашиваются достаточно интенсивно в темно-фиолетовый цвет. Слабее окрашиваются ядра мышечной и соединительной тканей. Окрашенные таким соком черники срезы не дифференцируются, поэтому к такой окраске нужно приспособиться и срезы сильно не перекрашивать. 📋 Протокол окраски с красителем Желтикова: Этот красящий раствор дает несравненно лучшие результаты, чем раствор Лавдовского. Работать с краской Желтикова значительно удобнее, и она допускает целый ряд вариантов окраски. 1️⃣ Первый вариант окраски. Срезы окрашивают квасцовым раствором черники в течение 3—5 минут (не более), затем основательно (5—10 минут) прополаскивают в водопроводной воде и переносят в 1% водный р